MUHTASARI NA MAELEZO YA MTIHANI
Malaria ni ugonjwa unaoenezwa na mbu, hemolytic, homa ambayo huambukiza zaidi ya watu milioni 200 na kuua zaidi ya watu milioni 1 kwa mwaka.Inasababishwa na aina nne za Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, na P. malariae.Plasmodia hizi zote huambukiza na kuharibu erithrositi ya binadamu, hutokeza baridi, homa, upungufu wa damu, na wengu.P. falciparum husababisha ugonjwa hatari zaidi kuliko spishi zingine za plasmodial na husababisha vifo vingi vya malaria.P. falciparum na P. vivax ndio vimelea vya maradhi ya kawaida, hata hivyo, kuna tofauti kubwa ya kijiografia katika usambazaji wa spishi.
Kijadi, malaria hugunduliwa kwa onyesho la viumbe kwenye smears nene ya Giemsa ya damu ya pembeni, na aina tofauti za plasmodiamu hutofautishwa na kuonekana kwao katika erithrositi iliyoambukizwa1.Mbinu hiyo ina uwezo wa utambuzi sahihi na wa kuaminika, lakini tu inapofanywa na wataalam wa hadubini wenye ujuzi kwa kutumia itifaki iliyofafanuliwa2, ambayo inatoa vizuizi vikubwa kwa maeneo ya mbali na masikini ya ulimwengu.
Seti ya Majaribio ya Haraka ya Malaria Pf / Pan Antigen imeundwa kwa ajili ya kutatua vikwazo hivi.Jaribio linatumia jozi ya kingamwili za monokloni na polikloni kwa protini maalum ya P. falciparum, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II), na jozi ya kingamwili za monokloni kwa plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH), protini inayozalishwa na aina nne za plasmodiamu, hivyo huwezesha ugunduzi na utofautishaji wa wakati huo huo wa maambukizi na P. falciparum na au plasmodia yoyote kati ya hizo tatu.Inaweza kufanywa na wafanyakazi wasio na ujuzi au wenye ujuzi mdogo, bila vifaa vya maabara.
KANUNI
Seti ya majaribio ya haraka ya Malaria ya Pf/Pan ni uchunguzi wa kinga ya kromatografia wa mtiririko.Vipengee vya utepe wa majaribio vinajumuisha: 1) pedi ya kuunganishwa ya rangi ya burgundy iliyo na kingamwili ya panya ya kupambana na pHRP-II iliyounganishwa na dhahabu colloid (viunganishi vya pHRP II-dhahabu) na kingamwili ya kupambana na pLDH ya panya iliyounganishwa na dhahabu colloid (viunganishi vya dhahabu ya pLDH),
2) ukanda wa membrane ya nitrocellulose iliyo na bendi mbili za majaribio (bendi za Pan na Pv) na bendi ya kudhibiti (C bendi).Pan band imepakwa awali kingamwili ya kupambana na pLDH ya monoclonal ambayo kwayo maambukizo ya aina yoyote kati ya nne za plasmodia yanaweza kugunduliwa, bendi ya Pf imepakwa awali kingamwili za polyclonal anti-pHRP-II kwa ajili ya kugundua maambukizi ya Pf; na bendi ya C imepakwa IgG ya mbuzi ya kuzuia panya.
Wakati wa kupima, kiasi cha kutosha cha sampuli ya damu hutolewa kwenye kisima cha sampuli (S) cha kaseti ya mtihani, buffer ya lysis huongezwa kwenye kisima cha buffer (B).Bufa ina sabuni ambayo inalaza seli nyekundu za damu na kutoa antijeni mbalimbali za plasmodiamu, ambazo huhama kwa hatua ya kapilari kwenye ukanda ulioshikiliwa kwenye kaseti.pHRP-II ikiwa itawasilishwa kwenye sampuli itafungamana na viunganishi vya pHRP II-dhahabu.Kisha immunocomplex inanaswa kwenye utando na kingamwili za anti-pHRPII zilizopakwa awali, na kutengeneza bendi ya Pf ya rangi ya burgundy, inayoonyesha matokeo chanya ya Pf.pLDH ikiwa zawadi katika sampuli itafungamana na viunganishi vya dhahabu vya pLDH.Kisha chanjo hunaswa kwenye utando na kingamwili ya anti pLDH iliyopakwa awali, na kutengeneza bendi ya Pan ya rangi ya burgundy, inayoonyesha matokeo chanya ya plasmodium.Kwa kukosekana kwa bendi ya Pan, matokeo chanya ya mtihani kwa plasmodia yoyote kati ya zingine tatu yanaweza kupendekezwa.
Kutokuwepo kwa bendi zozote za majaribio (Pan na Pf) kunapendekeza matokeo hasi.Jaribio lina udhibiti wa ndani (C bendi) ambayo inapaswa kuonyesha bendi ya rangi ya burgundy ya kinga ya mbuzi IgG / mouse IgG (pHRP-II na pLDH-dhahabu conjugates) bila kujali maendeleo ya rangi kwenye bendi zozote za majaribio. .Vinginevyo, matokeo ya jaribio ni batili na sampuli lazima ijaribiwe tena na kifaa kingine.
